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產品簡介
ANA中性粒細胞抗體ELISA試劑盒公司正在銷售的產品：IL-17E/IL-25/FITC 熒光標記白介-17E抗體IgG苯磺酰肼 98%IL-17F/IL-24/FITC 熒光標記白介-17F抗體IgGT 三水合物 AR,99.0%IL-18R Alpha/FITC 熒光標記白介-18受體α鏈抗體IgG對苯磺酯 98%IL-18R Beta/IL1R7/CD218b/FITC 熒光
產品分類
產品屬性：
產品名稱 | ANA中性粒細胞抗體ELISA試劑盒 |
英文名稱 | ANA ELISA Kit |
產品規格 | 48T/96T |
產品貨號 | LZ-E028593 |
需要而未提供的試劑和器材：
1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等。
標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
備試劑與收集血樣：
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
生長激素結合蛋白(P)試劑盒 吳茱萸內酯亞硝 CP,95%5-吲哚 99%
生長激素結合蛋白(P)試劑盒 吳茱萸新四草，二水 PT2-異煙 97%
上腺髓質素(ADM)試劑盒 吳茱萸總偏磷 AR肉桂酰 97%
上腺髓質素(ADM)試劑盒 五-O-乙酰-β-D-吡喃葡萄糖鍺試劑 AR3-肉桂 98%
免疫反應性生長激素(irGH)試劑盒五水合硫司巴丁鍺試劑 97%2-芐 99%
免疫反應性生長激素(irGH)試劑盒五味子素高 99.99% metals basis2--5- 99%
硫褪黑色素(MS)試劑盒五味子N-苯鄰氨苯（釩試劑） AR,95%2--5-苯 97%
硫褪黑色素(MS)試劑盒五味子乙N-苯鄰氨苯（釩試劑） 98%4-吲哚 98%
長效狀腺激素(LATS)試劑盒 五味子酚焦銻 AR,99.0%2-苯 98%
長效狀腺激素(LATS)試劑盒 五味子酚乙1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚 AR,90.0% 2-硫-5-嘧啶-4- 95%
上腺髓質素(ADM)試劑盒 五味子素1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚 98%2--4-硝吡啶 98%
上腺髓質素(ADM)試劑盒 五味子乙素多乙烯多 AR4-吲哚 98%
免疫反應性生長激素(irGH)試劑盒五味子酯檸檬二氫 AR,98.0%2--6-氟苯 98%
免疫反應性生長激素(irGH)試劑盒五味子酯戊氟氫化 AR，99.0%2--N,N-二乙酰 97%
抗利尿激素/血管加壓素/精氨加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒五味子酯乙氟氫化 CP，98.0%4--2-三氟喹啉 97%
抗利尿激素/血管加壓素/精氨加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒西貝母N-苯硫脲 98%2--4-吡啶 95%
ANA中性粒細胞抗體ELISA試劑盒本染色液是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成綠色或藍綠色，把細胞漿和細胞核中的核仁染成紅色的染色液。甲基綠可以和細胞核中的DNA結合，從而產生細胞核染色；而派洛寧可以和細胞漿或核仁中的RNA結合，從而可以使細胞漿和核仁被染色。改進了染色液配制方法，不含很多甲基綠-派洛寧染色液中使用的劇毒甲醇。本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本甲基綠-派洛寧染色液染色后進行免疫熒光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫組化染色后再進行甲基綠-派洛寧復染。一個包裝的本染色液至少可以染色200個樣品。
注意事項：
1. 需自備4%多聚、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片，需自備90%乙醇，無水乙醇以及二甲苯。
2第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預實驗。
儲存條件：室溫避光，有效期一年。
操作步驟：
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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