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產品簡介
宿主細胞殘留 DNA 試劑盒分子生物試劑人極低密度脂蛋白（VLDL）elisa試劑盒Anti-human Transferrin Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 信號轉導人白介素-21（IL-
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宿主細胞殘留 DNA 樣本前處理試劑盒(磁珠法)
試劑盒簡介：
宿主細胞殘留 DNA 樣本前處理試劑盒(磁珠法)用于樣本的前處理，可穩定高效地提 取出樣本中殘留的痕量宿主 DNA。
試劑盒組分：
序號 | 試劑 | 規格 | 儲存條件 |
1 | 裂解液 | 15ml×1 瓶 |
室溫 |
結合液(異丙醇) | 空瓶 | ||
洗滌液 | 40ml×2 瓶 | ||
樣本稀釋液 | 15ml×1 瓶 | ||
5M NaCl | 1ml×1 管 | ||
蛋白酶 K | 1ml×1 管 | ||
磁珠 | 6ml×1 瓶 | ||
洗脫液 | 10ml×1 瓶 | ||
2 | 肝糖原 | 1ml×1 管 | -20oC |
tRNA | 50ul×1 管 |
有效期： 12 個月
宿主細胞殘留 DNA 試劑盒分子生物試劑實驗流程(手工操作)：
注： 在開展實驗前， 請用精密 pH 試紙條測定樣本的 pH 值并將樣本 pH 值調節至 6-8.
實驗準備
↓
樣本準備
↓
樣本消化
↓
DNA 捕獲
↓
洗滌
↓
DNA 洗脫
實驗操作細則：
一、 樣本處理：
1. 取 100ul 待檢樣本至 1.5ml 干凈的離心管中，加入 10ul 5M NaCl 溶液，用渦旋 振 蕩器充分震蕩 10 秒；
2. 加入 10ul 蛋白酶 K，在渦旋振蕩器上充分震蕩 10 秒；
3. 配制新鮮的裂解液，其組成為： 130ul 裂解液/100ul 樣本， 9ul 肝糖原/100 樣本， 0.2ul tRNA/100ul 樣本，充分混勻以制成新鮮配制的裂解液；
4. 將 139ul 新鮮配制的裂解液加入到樣本管中， 然后用渦旋振蕩器充分震蕩 10 秒， 取出短 暫快速離心 5 秒，然后放置在 56oC 孵育 30 分鐘；
二、 DNA 捕獲：
1. 將磁珠充分渦旋振蕩以*重懸；
2. 將樣本管從孵育器中取出， 進行簡短的離心，將液體收集到管底，然后加入*重懸的 磁珠 60ul 和 230ul 結合液，在渦旋振蕩器上充分震蕩 10 秒； (注意： 在加入磁珠時， 需經 常振蕩重懸磁珠， 以保證吸取時磁珠的均勻性。建議每加 3-4 組樣本后， 重懸磁珠后再進行 后續樣本的添加)
3. 將震蕩后的樣本管，置于旋轉混勻器或渦旋振蕩器上 10 分鐘以進行磁珠捕獲；
4. 將樣本管從旋轉混勻器上取下，在 10000g 的條件下離心 1 分鐘使磁珠充分聚集；
5. 將離心后的樣本管置于磁力架上， 待溶液*澄清后， 用槍頭小心移去上清(注： 避免 槍頭攪動磁珠，使得磁珠同上清一起被除去從而影響得率)；
三、宿主細胞殘留 DNA 試劑盒分子生物試劑 洗滌：
1. 樣本管移去上清后，不必將樣本管從磁力架上取下，直接加入 400ul 洗滌液；
2. 待溶液*澄清后，磁珠*分離，用槍頭小心移去上清；
3. 保持樣本管在磁力架上， 加入 400ul 洗滌液， 待溶液澄清， 磁珠*分離后， 用槍頭小 心移去上清；
4. 將樣本管從磁力架上取下， 于 10000g 的條件下離心 30 秒，使得殘留的洗滌液*聚集 到管底；
5. 將樣本管置于磁力架上，待磁珠*分離后，用 10ul 槍頭小心移除殘留的液體；
6. 將樣本管從磁力架上取下，置于 70oC 金屬浴中，放置 4 分鐘， 除去殘留的乙醇(注： 若干燥不夠， 殘留的乙醇會影響后續的定量檢測反應)；待磁珠團出現裂紋時，將樣本管從 金屬浴中取出進行 DNA 洗脫；
四、 DNA 洗脫：
1. 沿著樣本管的管壁加入 50- 100ul 洗脫液，用 100ul 的槍頭反復吹吸，以*重懸磁珠；
2. 將樣本管置于 70oC 孵育器孵育 10 分鐘；
3. 將樣本管從孵育器中取出，于 20000g 離心 2 分鐘，然后至于磁力架上，待磁珠*分 離后，用 10ul 槍頭小心將上清液體轉移至新的干凈的離心管中；
4. 為了避免吸入磁珠，在離心管中還剩余少量液體時，將其于 20000g 離心 2 分鐘，然后 至于磁力架上以吸出剩余的液體。
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AB瓊脂 Alealine Bile Salt Agar 250克 分離霍亂弧菌
β－乳球蛋白（來源于牛乳）9045-23-2≥95（PAGE）
乳鐵蛋白（來源于牛乳）146897-68-9≥95（PAGE）
免疫球蛋白G（來源于牛乳）≥95（PAGE）
酪蛋白糖巨肽（來源于牛乳）≥90
α-乳白蛋白（含鈣，來源于牛乳）9051-29-0≥90(PAGE)
α-乳白蛋白（飽和鈣，來源于牛乳）9051-29-0≥90(PAGE)
α-乳白蛋白（脫鈣，來源于牛乳）9051-29-0≥90(PAGE)
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