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產品簡介
TI-Ag胸腺非依賴性抗原ELISA試劑盒公司正在銷售的產品：Melamine/OVA 三聚氰an偶聯雞卵白蛋白規格： 1mg*Melamine/BSA 三聚氰an偶聯牛血清白蛋白規格： 1mg*GABA/KLH γ1氨基丁suan偶聯血藍蛋白規格： 1mg*GABA/BSA γ1氨基丁suan偶聯牛血清白蛋白規格： 1mg*OCT2 (Octamer-
產品分類
產品屬性：
產品名稱 | TI-Ag胸腺非依賴性抗原ELISA試劑盒 |
英文名稱 | TI-Ag ELISA Kit |
產品規格 | 48T/96T |
產品貨號 | LZ-E028899 |
需要而未提供的試劑和器材：
1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等。
標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
備試劑與收集血樣：
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
豬Bcl-2相關X蛋白(BAX)試劑盒 蝸牛Fmoc-Leu-Wang resin 100-200 mesh, Substitution 0.3-0.8mmol/g鹽嗎啉胍 分析標準品，99.8%
豬(HYD)試劑盒蝸牛Fmoc-Lys(Boc)-Wang resin 100-200 mesh, 1%DVB標準溶液 10μg/ml,u=5～3%，
豬(HYD)試劑盒蝸牛凝集素L-亮氨-4- 99%標準溶液 100μg/ml,u=5～3%，
豬一氧化氮(NO)試劑盒蝸牛凝集素L-亮氨叔丁酯鹽鹽 98%磷 分析標準品，99%（劇品）
豬一氧化氮(NO)試劑盒蝸牛凝集素L-賴氨 98%磷標準溶液 100μg/ml,u=4%（劇品）
豬內皮型一氧化氮合成(eNOS)試劑盒蛋白KN-Boc-L-賴氨酯鹽鹽 98%磷標準溶液 10μg/ml,u=6%（劇品）
豬內皮型一氧化氮合成(eNOS)試劑盒胃蛋白抑制劑Nε-CBZ-L-賴氨芐酯鹽鹽 99%速滅磷標準溶液 10μg/ml,u=6～4%，（劇品）
豬內皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)試劑盒胃蛋白抑制劑CBZ-L-賴氨酯鹽鹽 98% 分析標準品，98.5%（劇品）
豬內皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)試劑盒胃蛋白抑制劑L-亮氨 96%標準溶液 100μg/ml,u=4%（劇品）
豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒核糖核抑制劑L-亮氨鹽鹽 98%標準溶液 10μg/ml,u=6%（劇品）
豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒核糖核抑制劑Leucokinin I ≥98% (HPLC)禾草知標準溶液 100μg/ml,u=2%
豬血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪氨激2(Tie-2)試劑盒胰蛋白抑制劑Levitide ≥97% (HPLC)禾草知標準溶液 10μg/ml,u=4%
豬血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪氨激2(Tie-2)試劑盒胰蛋白抑制劑Luteinizing hormone releasing hormone salmon ≥97% (HPLC)滅銹 分析標準品，99.5%
豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒胰蛋白抑制劑Litorin ≥97% (HPLC)草 分析標準品，93%
豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒抑肽（牛肺）N--L-脯氨,一水 98%殺撲磷 分析標準品，95%（劇品）
豬乙酰膽受體抗體(AChRab)試劑盒抑肽（牛肺）DL-硫氨 99%殺撲磷標準溶液 10μg/ml,u=6～4%，（劇品）
TI-Ag胸腺非依賴性抗原ELISA試劑盒用途：
神經HRP示蹤TMB(四甲基聯)顯色，反應較DAB法靈敏。
注意事項：
主要由TMB孵育液、、乙鈉緩沖液等組成，染色后呈藍色。
儲存條件：4℃，避光，12個月
操作步驟：
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立 轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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