乙酰膽堿轉移酶（ChAT）活性測定試劑盒

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更新時間：2021-08-30

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特點：
      1、優化設計的實驗方案，1小時即可完成
      2、靈敏度高，操作便捷
      3、試劑盒提供檢測所需的全套試劑

產品名稱	乙酰膽堿轉移酶（ChAT）活性測定試劑盒
規格	詳見說明書
貨號	LZ-S64400

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱（孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
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產品僅用于科研樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （過過濾）。
4 ）. 過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
特點為：
（1）應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區都有吸收，因此均可借此法加以測定。到目前為止，幾乎化學元素周期表上的所有元素（除少數放射性元素和惰性元素之外）均可采用此法。
（2）靈敏度高
由于相應學科的發展，使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展，從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究，使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言，光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用，在標準參考物質的研制中，它更受重視，很多光度分析法已制定成為標準方法。
（3）選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定，如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定，已有比較滿意的方法了。
（4）準確度高
對于一般的分光光度法來說，其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內，如采用示差分光度法測量，則誤差往往可減少到千分之幾。
（5）適用濃度范圍廣
可從常量（1-50%）（尤其是使用示差法）到痕量（10-6-10-8%）（經預富集后）。
（6）分析成本低、操作簡便、快速。
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操作流程：
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。