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產品簡介
超氧陰離子清除能力測試盒(微量法)公司正在出售的產品：冰凍切片組織αSMA表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次內皮生長添加物豬可溶性P選擇（sP-Selectin）ELISA試劑盒,石蠟切片組織αSMA表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次平滑肌生長添加物豬生長激釋放多肽（GHRP）ELISA試劑盒,GDF-1 生長、分化因子1抗體化乙輔A(PaCoA)ELISA試劑盒
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公司產品僅供科研使用，下列是產品屬性：
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 | 貨號 |
超氧陰離子清除能力測試盒(微量法) | 100管/96樣 | LZ-01X8382 |
商品介紹：
測定意義:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基，可攻擊生物大分子，如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等，使其交鏈或者斷裂，引起細胞結構和功能的破壞，與機體衰老和病變有很密切的關系，清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。
測定原理：
AP-TEMED系統產生超氧陰離子，與鹽酸羥胺反應生成NO2－，NO2－與對氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物，在530nm處有特征吸收峰，樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。
自備實驗用品及儀器：
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
實驗步驟：
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作程序：
注意：最重要的是及時固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC處理，以抑制RNA酶對mRNA的分解作用。此外，過度固定對原位雜交有明顯的不利影響。
1．玻片的處理：一般采用多聚賴氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．細胞在多聚賴氨酸處理的蓋玻片上進行培養，條件為37℃和5%的CO2，所用培養基為Dulbecco基礎培養基。細胞長好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分鐘×3次。
3．培養細胞和冰凍切片均可用下述方法固定：固定液為4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室溫固定 20--30分鐘。蒸餾水充分洗滌，干燥后-20℃冰凍可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+純甲醇50份混合，室溫處理30分鐘。蒸餾水洗滌3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%檸檬酸新鮮稀釋1ml 3% 檸檬酸加2滴濃縮型，混勻)，37℃或室溫消化5—120秒鐘。有時也可以不消化。原位雜交用 PBS洗3次×5分鐘。蒸餾水洗1次。
6.后固定：消化后才需要。固定液為1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室溫固定 10分鐘。蒸餾水洗滌3次。
7．預雜交：濕盒的準備——干的雜交盒底部加20%甘油20ml以保持濕度。按每張切片20μι加預雜交液。恒溫箱38-42℃2—4小時。吸取多余液體，不洗。
8．雜交——按每張切片20μι雜交液，加在切片上。將原位雜交專用蓋玻片的保護膜揭開后，蓋在切片上。恒溫箱38-42℃雜交過夜(根據雜交情況可以調節)。
9．雜交后洗滌：揭掉蓋玻片，37℃左右水溫的2×SSC洗滌5分鐘×2次；37℃0.5×SSC洗滌15分鐘×1次; 37℃0.2×SSC洗滌15分鐘×1次(如果有非特異性染色，重復0.2×SSC洗滌15分鐘×1-2次)。
10.滴加封閉液：37℃30分鐘。甩去多余液體，不洗
11.滴加化鼠抗*：37℃ 60分鐘或室溫120分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。
12.滴加SABC：37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×3次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。
13.滴加化過氧化物酶：37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。
14.DAB顯色：使用DAB顯色試劑盒—1ml蒸餾水加顯色劑Ａ，Ｂ，C各一滴，混勻，加至標本上。一般顯色20-30分鐘。若無背景出現則可繼續顯色。也可自配DAB顯色劑后顯色。充分水洗。
15.必要時蘇木素復染，充分水洗。
16.酒精脫水，二甲苯透明，封片。
IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白 (His 標簽)
ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質激素(18-39)(抗原)
BID重組小鼠 BID 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
CABP5重組人 CABP3 / CABP5 蛋白 (His 標簽) Protein
FZD4重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
EGF(Epidermal growth factor 0.5mgEGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長因子抗原(大鼠)
ITGAX & ITGB2重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白 Protein
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)
ACVR2A Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標簽)
EGF(Epidermal growth factor 0.5mgEGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長因子抗原(大鼠)
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)
FZD4重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ACVR2A Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標簽)
ITGAX & ITGB2重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白 Protein
FCGR1 Protein Mouse 重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated
GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1 0.5mgGLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide 胰高血糖素樣肽-1(多肽)
REG4重組大鼠 REG4 蛋白 (His 標簽) Protein
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽) Protein
MSLN Protein Human 重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 (Fc 標簽)
超氧陰離子清除能力測試盒(微量法)Guinea IgG/RBITC 羅丹明標記豚鼠IgG 0.3ml
Phospho-5-Lipoxygenase(Ser524) 英文名稱： 磷酸化5-脂氧合酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh DNPK1 DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體 規格 0.1ml
ACA-IgA(Mouse anti-cardiolipin antibody IgA) ELISA Kit 小鼠抗心磷脂抗體IgAMulti-class antibodies規格： 48T
微囊藻毒檢測試劑盒 96孔/盒 適用于水樣、藍藻、魚肉等樣品
Anti-CK5/FITC 熒光素標記細胞角蛋白5抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
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