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產(chǎn)品簡介
副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:CCSA-4檢測試劑盒果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
產(chǎn)品分類
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注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒價格 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7585 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
硝酸益康唑C30H50O(三氟甲基)*基硅烷
硝酸益康唑（標準品）C19H20O5*基溴硅烷
對磺酸鈉C18H16O7基*基硅烷
恩替卡韋C20H18O8(*基硅烷基)重氮
恩替卡韋（標準品）C15H18O8三(五氟基)烷
依帕司他C27H30O15三(*硅基)硅烷
鹽酸表阿霉素C22H40O5
鹽酸表阿霉素(標準品)C18H18O2三基硅烷
埃替非巴肽，依非巴特;安普利肽，依非巴肽C21H20O12十六烷基*氧基硅烷
鹽酸埃羅替尼C42H38O20十八烷基*氧基硅烷
鹽酸埃羅替尼（標準品）C42H38O201--6-基己烷
爾它培南鈉;厄他培南鈉C16H16O51,10-二溴癸烷
雌二,β-雌二C30H38O111,7-二溴庚烷
雌二,β-雌二（標準品）C8H12N21,8-二溴辛烷
甲酸雌二C48H78O191,5-二溴戊烷
甲酸雌二（標準品）C48H78O201,2-二溴烷
雌三C29H50O1,6-二溴己烷
雌三(標準品)C18H27,12-二溴十二烷
豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒ADFP 脂肪組織分化相關(guān)蛋白100 ug
豬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病毒AEV100 ul
豬αN酰葡糖糖苷酶(NAGLU)ELISA試劑盒ADAM10/MADM/CD156c 去整合素樣金屬蛋白酶10100 ul
豬α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒ADAMTS12 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12100 ul
豬Tau蛋白ELISA試劑盒ADH/AVP 抗利尿激素/血管升壓素100 ul
豬Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA試劑盒Adiponectin Receptor 1 脂聯(lián)素受體-120 ul
豬S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒Adiponectin receptor 2 脂聯(lián)素受體2100 ul
豬p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒Adiponectin 脂聯(lián)素100 ul
豬P450膽固側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒ADM/AM 腎上腺髓質(zhì)素100 ul
副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒價格8號染色體開放閱讀框47抗體Hispidulin中文名：粗毛豚草素別名：4',5,7-Trihydroxy-6-methoxyflavone; 高車前素分子式：C16H12O6
8號染色體開放閱讀框48抗體Ginkgetin中文名：銀杏素別名：分子式：C32H22O10
8號染色體開放閱讀框58抗體Isothymusin中文名：別名：4',5,8-Trihydroxy-6,7-dimethoxyflavone分子式：C17H14O7
8號染色體開放閱讀框74抗體Kaempferitrin中文名：苷別名：分子式：C27H30O14
8號染色體開放閱讀框76抗體Topazolin中文名：別名：分子式：C21H20O6
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
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