歡迎進入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網(wǎng)站！
13482402338
歡迎進入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網(wǎng)站！
13482402338
Product Center
產(chǎn)品簡介
苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒廠家上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:TTN檢測試劑盒1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；4. 洗板3次；
產(chǎn)品分類
相關文章
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
?
產(chǎn)品名稱 | 苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒廠家 |
英文名稱 | Xylella fastidiosaPCR |
貨號 | LZP7474 |
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
VB5Fmoc-Gly-Wang resin 100-200 mesh, Substitution 0.3-0.8mmol/g穿心蓮內(nèi)酯 98%
VB6L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽 98%熊果苷 99%
VB12L-谷氨酸-5-環(huán)己酯 98%扁桃苷 97%
PLPL-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽 97%扁桃苷 分析標準品，>98%
Pyridoxal hydrochlorideL-谷氨酸5乙脂 ≥98.5%胺 分析標準品，98%（HPLC)
Pyridoxamine 2HCLL-谷氨酸-5-甲酯 98%氫酸胺 98%
Isitol niacinateL-谷氨酸-5-叔丁酯鹽酸鹽 98%牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)
VK4L-谷氨酸二叔丁酯鹽酸鹽 97%牛蒡子苷 分析標準品，>98%
VBT(R)-2-氨基-5-叔-丁氧基-5-羰基戊酸 ≥98.5%青蒿素 分析標準品
(±)-Carnitine hydrochlorideBOC-谷氨酰胺-OL 98%積雪草酸 98%
INAHL-谷氨酸-α-芐酯 98% 分析標準品，≥97%
VPL-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽 98%土木香內(nèi)酯 分析標準品，≥97%(HPLC)
Orotic acidL-谷氨酸對硝基酰苯胺 98%異補骨脂素 分析標準品，>98%
D-Sodium isoascorbiate甘肽 ≥97% (HPLC)蘆薈寧 分析標準品，≥99%
AstaxanthinGalanin rat ≥97% (HPLC)脫羊藿素 分析標準品,≥99%(HPLC)
Dehydroascorbic acid神經(jīng)節(jié)肽(抗原) ≥97% (HPLC)硫辛酸 98%
鄰硝基氯苯標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)tch1 (5B5) Rat mAbMMP-15 基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體
間氯苯酚標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)TDP43 (G400) AntibodyMMP-14 基質(zhì)金屬蛋白酶-14抗體
2,5-二甲酚標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)p70 S6 Kinase MCF7 Control Cell ExtractsMMP-13 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗體
一氯二溴標準溶液(387±18μg/ml,溶劑:甲)TDP43 (A260) AntibodyMMP-12 基質(zhì)金屬蛋白酶-12抗體
乙標準溶液(0.807mg/mL,基體:)PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAbMMP-11 基質(zhì)金屬蛋白酶-11抗體
間硝基氯苯標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAbMMP-10 基質(zhì)金屬蛋白酶-10抗體
1,2,3,4-四氯苯標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)MLANA/MART-1 AntibodyMMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體
1,2,4-三氯苯標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)Phospho-μ-Opioid Receptor (Ser375) AntibodyMMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體
叔戊(Standard for GC,≥99.5%(GC))Rabbit IgG Isotype Control (Alexa Fluor® 647 Conjugate)MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體
2-乙酰吡啶(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Doublecortin (Ser334) AntibodyMMAA/cblA 甲基二酸尿癥cblA抗體
苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒廠家G蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體Dehydroherbarin中文名：別名：分子式：C16H14O5
G蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體Herbarin中文名：別名：分子式：C16H16O6
己糖6磷酸脫氫酶抗體Colelomycerone A中文名：別名：分子式：C17H18O6
生發(fā)中心B淋巴細胞相關蛋白2抗體Herbaridine B中文名：別名：分子式：C17H20O6
G蛋白偶聯(lián)受體172B抗體Shiraiachrome A中文名：別名：分子式：C30H26O10
當前位置：
上一個：
返回列表
