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產品簡介
羊流產沙門氏菌PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:iso-Hyd檢測試劑盒 在ELISA中應用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。
產品分類
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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 羊流產沙門氏菌PCR檢測試劑盒規格 |
英文名稱 | Salmonella abortus ovisPCR |
貨號 | LZP7248 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
Pyridaben分散黃39 分析標準品正辛酸 AR,99%
ImidaclopridN,N-二甲基對苯二胺 98%正辛酸 ≥98%, FG
TMTDN,N-二甲基對苯二胺 90%正 AR,97%
ESBO2-溴乙胺鹽 98%化 AR,≥99.0%
Ruscogenin2-二乙氨基氯乙烷鹽酸鹽 99%化 GR,≥99.5%(AT)
Sarsasapogenin5-氯楊酸 99%化 ≥99.99% metals basis
Schleicheol 1氯化膽堿 AR，98%化 CP,98.0%
Schleicheol 2氯化膽堿 99%化 ACS, ≥99.0%
Tigogenin二月桂酸二丁基錫 95%化 ≥99.999% metals basis
Sitoindoside I2-二甲氨基氯乙烷鹽酸鹽 99%化溶液 100g/L
Sitostene二酸二乙酯 99%化鈉 AR,99.5%
Beta-Sitosterol二乙氨基乙 99%化鈉 99.99% metals basis
Sitosteryl palmitate2,3-二溴丁二酸 98%三氟磺酸 98%
Stellasterol二乙烯三胺五乙酸 CP三氟磺酸 99%
Stigmast-4-ene-3,6-diol二乙烯三胺五乙酸 AR,99.0%三酐 98%
Stigmast-4-ene-3,6-dione鹽酸二 99%聚四氟磁力攪拌子 A-507
異煙酸Sec24D (D9M7L) Rabbit mAbPhospho-SRF (Ser103) 磷酸化生長激素釋放因子抗體(血清應答因子)
L-蘋果酸FRMD6 (D8X3R) Rabbit mAbPhospho-SRC-3 (Thr24) 磷酸化類固受體輔助活化因子-3
蛋白酶K溶液(20 mg/ml)MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Ami-terminal Antigen)phospho-Src(Tyr529) 磷酸化Src原癌基因抗體
多聚賴氨酸0.1%溶液PTPN22 (D6D1H) Rabbit mAbphospho-Src(Tyr418) 磷酸化Src原癌基因抗體
鹽酸四環素溶液,50 mg/mlVCAM-1 Antibody (Rodent Specific)phospho-Src(Tyr215) 磷酸化Src原癌基因抗體
8-羥基喹啉硫酸鹽(植物細胞培養級)Delta FosB (D3S8R) Rabbit mAbphosphos-PCNA (Tyr211) 磷酸化增殖細胞核抗原抗體
D-葡糖糖-6-磷酸二鈉二CBX8 (D2O8C) Rabbit mAbphospho-SOX9(Ser181) 磷酸化轉錄因子SOX9蛋白抗體
亞硫酸氫鈉(AR)Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAbphospho-SNAI2(Ser155+Ser158+Ser160+Tyr164+Tyr169) 磷酸化鋅指轉錄因子Slug抗體
丁二酸鈉(AR)Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAbPhospho-SMC1(Ser957) 磷酸化染色體結構維持蛋白質１抗體
氯化銅二(AR)Ret (D3D8R) Rabbit mAbPhospho-SMC1 (Ser360) 磷酸化染色體結構維持蛋白質１抗體
羊流產沙門氏菌PCR檢測試劑盒規格兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：2～8℃100毫升
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
兔子透明質酸(HA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：2～8℃25毫升
兔子脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：1米
兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：RT10克
兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：1米
兔子纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
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