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產品簡介
科恩酒曲菌PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:FLU檢測試劑盒將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄
產品分類
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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 科恩酒曲菌PCR檢測試劑盒規格 |
英文名稱 | Rhizopus cohniiPCR |
貨號 | LZP7228 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
Procyanidin正 Standard for GC，>99%(GC)1-烷 99%
Grape Seed Extract乙酸正酯 AR,99.0% CP,95.0%（）
Procyanidin B2甲醋酸酯 99% AR,98.0%（）
4-Ami-1-methyl-3-n-propyl-5-pyrazolecarboxamide乙二 99.4%三溴化磷 CP,98.0%
Grease of high temperature III正 CP,98.5% 四 97%
Piperine聚乙烯吡咯烷酮 平均分子量 8000, K16-18酸性品紅 高純級，70%
TBAF三氯乙烯 CP,98.5%考馬斯紫R 50%，強度250%
TBAF trihydrate1,2,3,4-四氫萘 CP隱丹參酮 98%
2-Hexane1,2,3,4-四氫萘 AR，97%二氫丹參酮 分析標準品，≥98%
p-Tolualdehyde1,2,3,4-四氫萘 Standard for GC, ≥99.5% (GC)丹參酚酸B 分析標準品，≥98%
cis-Aconitic acid1,2,3,4-四氫萘 >98.5%(GC)丹參酮IIA磺酸鈉 分析標準品，≥98%
Sodium dichloroisocyanurate1,2,3,4-四氫萘 分析標準品，≥99.5% (GC)丹參素鈉 分析標準品，>98.5%
4-Chloromercuribenzoic acid四 ACS，>99.5% (GC) 丹參素鈉 98%
Polyanetholesulfonic acid sodium salt四氯乙烯 CP，97%丹參酮I 分析標準品，≥98%
Ferron硫代乙酸 AR,90.0%丹參酮IIA 分析標準品，≥98%
Talc硫代乙酸 GR,98%丹參酮IIA 98%
放線菌素D(進分)Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Biotinylated)Plexin B2 神經叢蛋白B2抗體
放線菌素DCaspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAbPlexin B1 神經叢蛋白B1抗體
依維菌素Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAbPlexin A2 神經叢蛋白A2抗體
細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)Phospho-Rad50 (Ser635) AntibodyPlexin A1 神經叢蛋白A1抗體
CAPE (咖啡酸苯乙酯)Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Biotinylated)PLEKHM3 血小板白細胞C激酶底物同源結構域M3抗體
磺胺-5-甲氧嘧啶(98%)Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (PE Conjugate)PLEKHM2/SKIP 血小板白細胞C激酶底物同源結構域M2抗體
雙甲脒（標準品）SimpleChIP® Chromatin IP BuffersPLEKHM1 石骨癥相關蛋白PLEKHM1抗體
雙甲脒UBE2C AntibodyPlectin 網蛋白抗體
檸檬酸一Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)Pleckstrin/p47 血小板47蛋白抗體
SalubrinalPerifosinePLDL1/PLCE 磷脂酶C1樣蛋白抗體
科恩酒曲菌PCR檢測試劑盒規格兔Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：1公斤
兔p53(p53)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
兔p物質(SP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：5KU
兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：保存：-20℃250毫克
兔阿素(ADR)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：5克
兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
兔吡啶交聯物(PY)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：10克
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
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