歡迎進入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網站！
13482402338
歡迎進入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網站！
13482402338
Product Center
產品簡介
羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家上海聯(lián)祖生物相關產品:HGV-IgM檢測試劑盒以鄰苯二胺（OPD）為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺（TMB）為底物的試劑則不需避光，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械
產品分類
相關文章
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家 |
英文名稱 | Schistosoma mattheei,PCR |
貨號 | LZP7282 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
Ocotillone4-基聯(lián)苯 97%Ph試紙 1-14
Odoratone頻那 99%大口三角燒瓶 500ml
Ohchinin acetate對苯二甲 98%直三口燒瓶 500ml
Ohchinin對苯二甲 CP具塞三角燒瓶 500ml
(Z)-23-Coumaroylhederagenin鄰 98%茄型燒瓶 500ml 24口 磨口
Olean-12-ene-3,11-diol亞磷酸三乙酯 98%茄型燒瓶 250ml 24口 磨口
Olean-12-ene-3,11-dioneN-乙基哌 98%短管標準漏斗 40mm
Olean-12-ene-3,24-diol1-乙基哌啶 98%短管標準漏斗 75mm
Olealic acid-3-O-beta-D-glucopyrasyl (1→2)-alpha-L-arabipyrasideN-(2-羥乙基)乙二胺 99%短管標準漏斗 150mm
Olealic acidN-(2-羥乙基)哌 98%茄形燒瓶 100ml/24#
Onjisaponin B高哌 98%直口三角燒瓶 1000ml
Pachymic acid2-甲基哌 98%直三口燒瓶 250ml/24#，24#，24#
Palbine1-甲基哌 99%直三口燒瓶 1000ml/24#，24#，24#
Panaxadiol無哌 99%塑料量杯 5L
Panaxatriol鈉 CP,98.0%塑料量杯 2L
Pedunculoside氫化鈉 80%洗耳球 90ml
2'-脫氧胞苷-5'-二磷酸三鈉鹽(分子生物學級)PSD93 (D4Z4D) Rabbit mAbPhospho-NF2(Ser518) 磷酸化2型神經纖維瘤抗體
(>98%,BR)DMAP1 (D4O2G) Rabbit mAbphospho-NF1(Ser2817) 磷酸化1型神經纖維瘤抗體
DMPSimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primersphospho-NF1(Ser2515) 磷酸化1型神經纖維瘤抗體
沒食子酸月桂酯(>98.5%,BR)F4/80 (BM8.1) Rat mAb (APC-Cy7® Conjugate)phospho-NEK9(Thr210) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK9抗體
dUMP;2'-脫氧尿苷-5'-磷酸二鈉鹽α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbPhospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體
乙胺鹽酸鹽(>98%,BR)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbPhospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相關基因NDRG1抗體
呋喃三二鈉鹽ST14/Matriptase AntibodyPhospho-NDRG1 (Ser330) 磷酸化分化相關基因NDRG1抗體
3-吲哚基-beta-D-吡喃葡萄糖苷(>98%,BR)BST2 (D5V5Z) Rabbit mAbphospho-NDEL1(Thr219) 磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體
氧化鑭(>99%,EP)Arginase-2 Antibodyphospho-NDEL1(Ser242) 磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體
氯化鎂六(分子生物學)PCSK7 (D4I5G) Rabbit mAbphospho-NDEL1(Ser231) 磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體
羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家小鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：RT，避光25克
小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：25克
小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：RT25克
小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：1公斤
小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
當前位置：
上一個：
返回列表
