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產品簡介
痤瘡丙酸桿菌PCR檢測試劑盒說明書上海聯祖生物相關產品:VMA 檢測試劑盒各種種屬ELISA試劑盒產品齊全，質量可靠公司采用產品名稱的全是進口原材料研，發靈敏性高
產品分類
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組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 痤瘡丙酸桿菌PCR檢測試劑盒說明書 |
英文名稱 | Propionibacterium acnesPCR |
貨號 | LZP7183 |
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
Tridecane橄欖油 CP4-氟苯胺 99%
Tetradecane橄欖油 藥用級，Ph Eur1-氟-4- 98%
Hexadecane亞磷酸三乙酯 98%4-氟苯酚 99%
Heptadecane二茂鐵 98%4－羥基－環己烷甲酸乙酯 98%
nadecane二茂鐵 99%膽酸甲酯 97%
Heptacosane聚（甲基烯酸甲酯） SU牛磺脫氧膽酸 98%
Octacosane聚苯乙烯(PS) 通用型II,高強度甘膽酸鈉 98%
Hexatriacontane聚苯乙烯(PS) 通用型III,高強度、押出用、食品用甘氨脫氧膽酸鈉 97%
DEP聚苯乙烯(PS) 耐沖擊型鵝去氧膽酸鈉 97%
Naphthol AS-MX phosphate聚苯乙烯(PS) 高光澤度級膽酸鈉 98%
Naphthol AS-TR phosphate聚苯乙烯(PS) 擠出級1-乙基-2-吡咯烷酮 99%
Naphthol AS-BI phosphate聚苯乙烯(PS) 食品級γ -丁內酯 AR, ≥99%
GMS硫代乙酸銨 試劑級,70%溶液γ -丁內酯 >99.9% (GC)
Dimethyl succinate硫代乙酸 CP,85.0%N-甲基吡咯烷酮 AR,99.0%
MAA鄰苯二甲酸二異辛酯 CP，98%N-甲基吡咯烷酮 CP,98.0%
Methyl 4-hydroxybenzoate鄰苯二甲酸二辛酯 GRN-甲基吡咯烷酮 for HPLC, ≥99.5%
鹽酸甲苯噻/泊酚雜質JPhospho-Stat4 (Tyr693) (D2E4) Rabbit mAb (PE Conjugate)Rabbit anti-Goat IgM whole serum 兔抗羊IgM抗血清
鹽酸甲苯噻/泊酚雜質J(標準品)TEAD3 AntibodyRabbit Anti-Goat IgM 兔抗羊IgM
N-乙酰神經氨酸/唾液酸NIPSNAP1 (D1Y6S) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgG
紅霉素Phospho-α-E-Catenin (Ser655/Thr658) AntibodyRabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗羊IgG
紅霉素(標準品)T-bet/TBX21 (D6N8B) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗羊IgG
烏甲素（標準品）T-bet/TBX21 (D6N8B) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗羊IgG
高烏甲素DCP1B (D2P9W) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗羊IgG
鹽酸多巴酚丁胺CD46 (D6N7H) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgG/PE PE標記的兔抗羊IgG
羥基β環糊精;2-羥基-β-環糊精Kinectin 1 (D5F7J) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗羊IgG
羧甲基殼聚糖LIMD1 AntibodyRabbit Anti-Goat IgG/Gold 膠體金標記的兔抗羊IgG
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