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產品簡介
綿羊腺病毒PCR檢測試劑盒說明書上海聯祖生物相關產品:GSK2檢測試劑盒申購的標準品或對照品的批號要與新頒布標準品或對照品批號相符；
產品分類
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組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 綿羊腺病毒PCR檢測試劑盒說明書 |
英文名稱 | Ovine AdenovirusPCR |
貨號 | LZP7095 |
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
Staurosporine from Streptomyces sp.β-萘胺標準溶液 分析標準品，10 ng/μl丁位癸內酯 98%
Triclosanβ-萘胺 分析標準品鄰甲氨基苯甲酸甲酯 98%
Trimethoprim1-萘磷酸 99%位癸內酯 98%
Trimethoprim lactate salt煙堿 異構體總量：99%（）鄰甲氨基苯甲酸甲酯 ≥98%, FCC, Kosher
Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus氯草定 分析標準品正癸 98%
Valimycin順-6-壬烯 95%1,4-二甲氧基苯 99%
Zeocin油 ≥99% (GC)一縮二 99%
(-)-Lobeline hydrochloride十八 standard for GC, ≥99.5% (GC)一縮二 98%
Epivir-HBV3-辛酮 Standard for GC, ≥99.5% (GC)癸 97%
Moxifloxacin hydrochloride2-辛基-4-異噻唑啉-3-酮 分析標準品2,5-二甲基吡 98%
Moxifloxacin1-十八烯 分析標準品， ≥99.5% (GC)丁位十二內酯 98%
(±)-Verapamil hydrochloride消草磺靈 分析標準品乙酸癸酯 98%
Glimepiride草酸 ≥99.9999% (metals basis)乙酸二甲基原酯 99%
Chrysin四十八烷 Standard for GC，≥99.0% (GC)乙酸二原酯 98%, FCC, Kosher
Chlorpheniramine maleateα-氧代-2-呋喃乙酸 97%2,6-二甲基-2-庚 99%
6-APA奧美拉唑癸酸乙酯 99%
頭孢曲松鈉IRF-3 (D9J5Q) Mouse mAbSEI2/SERTAD2 調控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體
頭孢曲松鈉（標準品）Phospho-EGF Receptor (Tyr1068) Blocking PeptideSecurin/PTTG 垂體腫瘤轉化基因抗體
頭孢他啶(含碳酸鈉)IRAK1 (D51G7) Rabbit mAb (Biotinylated)SECTM1 分泌和跨膜蛋白1抗體
頭孢唑啉鈉Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)Secretin receptor 分泌素受體抗體
頭孢唑啉鈉（標準品）Phospho-Akt (Ser473) Blocking PeptideSecretin 分泌素抗體
酸氟替卡松Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) Blocking PeptideSEC14 like protein 2/Squalene transfer protein α維生素E相關蛋白抗體
酸氟替卡松（標準品）S6 Ribosomal Protein Blocking PeptideSDHD 線粒體琥珀酸脫氫酶D抗體
哌拉西林鈉Zap-70 Blocking PeptideSDHC 琥珀酸細胞色素亞基B560抗體
哌拉西林鈉(標準品)Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) Blocking PeptideSDHB 鉻細胞瘤患者抑癌基因SDHB抗體
環吡司胺; 環吡酮胺Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) Blocking PeptideSDHA 琥珀酸脫氫酶復合體亞基A抗體
綿羊腺病毒PCR檢測試劑盒說明書人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
人膠原吡啶交聯(PYD)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：25克
人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：25克
人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
人膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：1公斤
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