歡迎進入上海聯祖生物科技有限公司網站！
13482402338
歡迎進入上海聯祖生物科技有限公司網站！
13482402338
Product Center
產品簡介
肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒廠家上海聯祖生物相關產品:AZU檢測試劑盒微量試劑取用前請離心集液操作步驟可以以此為基礎稍作修改即可，故不再贅述
產品分類
相關文章
?
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒廠家 |
英文名稱 | Nocardia carneaPCR |
貨號 | LZP7066 |
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
N-CBZ-L-Proline小鼠關節軟骨細胞*培養基二乙酰一肟 AR
Z-D-Pro-OH小鼠胎兒成纖維細胞*培養基二乙酰一肟 >98.0%(GC)
Z-L-Isoleucine小鼠胎兒表皮角質形成層細胞*培養基氫酸 AR,≥47.0%
Z-Leu-OH小鼠成年表皮角質形成層細胞*培養基五鈉 80%（）
Z-D-Leu-OH小鼠表皮角質形成細胞*培養基間溴氟苯 99%
Z-D-Phenylalanil小鼠皮下脂肪細胞*培養基三氧化二銻 SP
Z-Ser-OH小鼠內臟脂肪細胞*培養基三氧化二銻 99.99% metals basis
CBZ-L-Tryptophan小鼠表皮黑色素細胞*培養基銻粒 99.999% metals basis,beads,1-6 mm
CBZ-D-Trp小鼠小梁網細胞*培養基銻粒 99.99% metals basis
Fmoc-D-Ala-OH小鼠視網膜色素上皮細胞*培養基銻粒 99.9999% metals basis
Fmoc-Ala-OH小鼠視網膜muller細胞*培養基高純 67:33 混合酸鹽熔劑 99.98%,33%焦酸鋰67％偏酸
Fmoc-Phe-OH小鼠虹膜色素上皮細胞*培養基高純 12:22 混合酸鹽熔劑 99.98%,35.3 %焦酸鋰64.7 %
Fmoc-D-Phe-OH小鼠晶狀體上皮細胞*培養基銅粉 99.9% metals basis,200目
N-Fmoc-L-Asparagine小鼠角膜上皮細胞*培養基磷酸鋰 99%
Fmoc-Gln-OH小鼠角膜內皮細胞*培養基磷酸鋰 99.99% metals basis
Fmoc-Asn-OH小鼠視網膜神經節細胞*培養基偏酸鋰 ≥99.99%
米諾地爾（硫酸鹽）敏樂啶CD25/IL-2RA(Imterleukm-2 Receptor alpha) CD25/白介素2-受體(抗原)SRRM1 絲氨酸/精氨酸相關核基質蛋白1抗體
米諾地爾（硫酸鹽）敏樂啶(標準品)CD31(PECAM-1) 血小板內皮細胞黏附分子-1（抗原）SRPK2 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK2抗體
C(標準品)CD34 CD34(多肽抗原)SRPK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK1抗體
D56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神經細胞粘附分子1(抗原)SRGN/Chondroitin sulfate proteoglycan core protein 硫酸軟骨素多糖核心蛋白抗體
(進分)CEAcam8/CD67 癌胚抗原相關細胞粘附分子8srGAP3 精神障礙相關GAP蛋白抗體
咪唑司汀CD68 CD68抗原SRG11/Spata17 凋亡基因抗體
嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯CD68 CD68（多肽抗原）SRFBP1 血清應答因子結合蛋白1抗體
嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯（標準品）CD117/c-kit/SCFR 干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原（抗原）SRF/SAP2/MCM1 生長激素釋放因子抗體(血清應答因子)
奈拉濱CD133 造血干細胞抗原（多肽抗原）SREBP-2 膽固調節元件結合蛋白2抗體
醋酸奈西立肽CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)SREBP-1 膽固調節元件結合蛋白1抗體
肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒廠家人多巴色素異構酶(DT)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：2～8℃，避光10克
人多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：25克
人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：25克
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：5克
人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：100克
人多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：1克
人多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：25克
人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量：2～8℃1克
當前位置：
上一個：
返回列表
