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產品簡介
念珠菌通用PCR檢測試劑盒說明書上海聯祖生物相關產品:talin檢測試劑盒TM（Thrombomodulin） 血栓調節蛋白多肽Tn-C（Tenascin-C）C-Terminus 腱糖蛋白-C（固生蛋白）C端抗原
產品分類
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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 念珠菌通用PCR檢測試劑盒說明書 |
英文名稱 | Candida spp.PCR |
貨號 | LZP6535 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
DL-丙氨酸價格Anti-PAX1 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子
β-丙氨酸保存Anti-PAX2 Antibody(原貨號PB0776)研究領域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學 信號轉導
?DL-纈氨酸價格Anti-PAX3 Antibody研究領域 神經生物學 信號轉導 細胞膜受體 細胞粘附分子 細胞骨架 細胞外基質
L-甘-甘-纈三肽價格Anti-PAX4 Antibody研究領域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶 線粒體 泛素
?L-甲狀腺素實驗步驟Anti-PAX5 Antibody研究領域 心血管 細胞生物
D-絲氨酸甲酯鹽酸鹽實驗步驟Anti-PAX6 Antibody(原貨號PB0821)研究領域 神經生物學 干細胞 細胞粘附分子 細胞骨架
L-酪氨酸叔丁酯實驗步驟Anti-PCDH15 Antibody研究領域 腫瘤 心血管 細胞生物 生長因子和激素 新陳代謝
BOC-L-苯甘氨酸實驗步驟Anti-PAX8 Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 細胞凋亡
BOC-硝基-L-精氨酸實驗步驟Anti-PBK Antibody研究領域 腫瘤 新陳代謝 線粒體
FMOC-L-蘇氨酸保存Anti-PCK1/PEPC Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 染色質和核信號 神經生物學 細胞凋亡
L-谷氨酸-5-甲酯使用說明書Anti-PCK2 Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 信號轉導 通道蛋白
氯甲基樹脂實驗步驟Anti-PCSK1 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 細胞骨架 細胞外基質 泛素
瓊脂糖凝膠4B價格Anti-PCSK4 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉導 新陳代謝
透析袋3500價格Anti-PCSK9 Antibody研究領域 細胞生物 信號轉導 轉錄調節因子 通道蛋白
35mm細胞培養皿價格Anti-PCSK6 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 染色質和核信號 微生物學
硫化亞鐵FeSCP500g
A5006-25GL-Arginine L-精安酸74-79-325g76
A0414-100mGAmphotericin B 兩性霉素 B1397-89-3100mg
SDS-PAGE Loading Buffer(5X)5ml
錄化硝基四氮唑蘭500mg
聯本Bipxenyl色標5g
ER0501HindIII5000 units16
10843555001-1g/20mlHygromycin B 潮霉素 B31282-04-91g/20ml
D-果糖100g
L-精安酸L-argininepR25g
大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)ELISA試劑盒 ，英文名： IGFBP6 ELISA Kit
Mouse endothelial niic oxide syhase 3 (eS-3) ELISA Kit 小鼠內皮型一氧化氮合成酶3(eS-3)ELISA試劑盒
MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCyclin-D3ELISAKit人細胞周期素D3規格：48T/96T
細胞AURORA-A激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitON大鼠骨粘連蛋白規格：48T/96T
念珠菌通用PCR檢測試劑盒說明書吲哚乙酸抗體/植物生長素抗體Psiguadial D中文名：別名：分子式：C30H34O5
整合素α6抗體4,5-Diepipsidial A中文名：別名：分子式：C30H34O5
吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體15-Dihydroepioxylubimin中文名：別名：10-epi-3β-Hydroxy-15-dihydrolubimin分子式：C15H26O3
整合素αVβ3抗體Alpiniaterpene A中文名：別名：分子式：C16H22O4
胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗體8α-Methacryloyloxybalchanin中文名：別名：分子式：C19H24O5
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
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